亲子鉴定在做实验PCR反应中,DNA扩增过程遵循酶促动力学原理。在反应初期,目的DNA片段呈指数增加,随着目的DNA产物的逐渐积累,在引物-模板与DNA聚合酶达到一定比例时,酶的催化反应焰于饱和,此时目的DNA片段的增加减慢进入相对稳定状态,即出现所谓的“停滞效应”或“平台期”。亲子鉴定平台期的出现可能与下列因素有关:①引物与dNTP消耗过多;②长时间高温使Taq DNA聚合酶的活性下降;③匆“增终产物(焦磷酸盐和双链DNA)的抑制作用;④非特异性产物与引物二聚体对反应物的竞争;⑤高浓度产物使扩增产物解链不完全;⑥当产物浓度高于iO-emol/L时,可能降低Taq DNA聚合酶的延伸和加工能力,或出现引物的分支迁移物移位;⑦酶与PCR产物结合后,游离浓度降低.到达平台期所需PCR循环次数取决于模板DNA的拷贝数、PCR扩增效率、DNA聚合酶wj种类l活性、非特异性产物的竞争等因索。
2022-01-22 17:10:21
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