复合荧光标记多重PCR扩增体系上海亲子鉴定http://www.dnafls.com/亲子鉴定的建立采用Primer 3软件包设计筛选获得InDel位点及Amelogenin基因座性别鉴定位点的多重PCR引物。以9947A为模板采用所设计的引物进行单位点PCR 扩增,琼脂糖凝胶电泳评估引物扩增效果。
依据扩增子长度将InDel位点分为4 组,分别采用上海亲子鉴定http://www.dnafls.com/亲子鉴定FAM、HEX、TAMERA和ROX 4种荧光素标记,调整每一引物,的浓度使之适合QIAGEN多重PCR扩增体系。多重PCR扩增体系为15.0弧,包括MasterMix 7. 5P-l、Q-solution 1.5Vl, PrimerMix 3.0,ui、模板DNA 3.0y.i。霾蚍抛条倣9YC llmin* 940C 30s, 57~ 90s, 72C90s,共3沁环;60℃延伸60rnjn“单位点PCR扩增时按上述循环参数进行35个循环后72℃延伸10min。
2022-01-22 17:10:21
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